Prevalencia de Trypanosoma cruzi en triatominos silvestres de Nuevo León, México / Trypanosoma cruzi in triatomines from Nuevo Leon, Mexico

OBJETIVO: Determinar la prevalencia de Trypanosoma cruzi en triatominos Triatoma gerstaeckeri de Nuevo León, mediante la estandarización de una técnica inmunoenzimática. MATERIAL Y MÉTODOS: Se colectaron 52 chinches en General Terán, N.L. desde julio hasta septiembre de 2005, las cuales se analizaron por microscopía óptica (MO) y reacción en cadena de la polimerasa (PCR) como estándares de referencia para establecer una técnica de detección del parásito por el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). RESULTADOS: Por MO y PCR, 31 triatominos fueron positivos y 21 negativos; por ELISA los resultados difieren con 27 positivos y 25 negativos (100 por ciento de especificidad, 87 por ciento de sensibilidad, 84 por ciento de valor predictivo negativo y 100 por ciento de valor predictivo positivo). Por MO y PCR, la prevalencia de triatominos infectados fue de 59.61 por ciento y por ELISA, de 51.92 por ciento; por lo que se confirmó la utilidad, rapidez y elevado índice de confianza del ensayo de ELISA. CONCLUSION: Los resultados obtenidos por la técnica de ELISA son útiles para enfocar los nuevos estudios epidemiológicos con un mayor número de vectores, ya que fue posible analizar simultáneamente la mayor cantidad de muestras, con niveles de sensibilidad y especificidad elevados y a menor costo que el PCR; por lo tanto, se recomienda para programas de vigilancia epidemiológica preventiva como primera prueba de tamizaje, antes de realizar análisis confirmatorios por PCR.

OBJECTIVE: To determine the prevalence of Trypanosoma cruzi in triatomines from Nuevo León using the standardization of an improved enzyme-linked immunosorbent assay test. MATERIALS AND METHODS: From July to September 2005, 52 triatomines were captured in General Terán, a municipality located in Nuevo León. They were analyzed using optical microscopy (OM) and a polymerase chain reaction (PCR), as standards of reference, to develop a technique for detecting the parasite using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). RESULTS: Using OM and PCR, 31 triatomines were found to be positive and 21 negative. Using ELISA, 27 samples were identified as positive and 25 negative (specificity 100 percent, sensitivity 87 percent, negative predictive value 84 percent, and positive predictive value 100 percent). The prevalence of infected triatomines was 59.61 percent with OM and PCR, and 51.92 percent with ELISA. Our data confirm that the ELISA assay in triatomines is a fast, reliable and useful tool. CONCLUSIONS: Since it was possible to simultaneously analyze a large number of samples with high sensibility and specificity values, the ELISA test proves to be useful for new epidemiologic studies having a high number of vectors. It is also less expensive than PCR. It is therefore recommended for epidemiological and preventive surveillance programs as a first screening test before conducting a confirmatory test using PCR.

Prevalencia de anticuerpos contra Trypanosoma cruzi en donadores de sangre del IMSS, Orizaba, Veracruz, México / Prevalence of antibodies against Trypanossoma cruzi in blood bank donors from the IMSS General Hospital in Onizaba, Veracruz, Mexico

OBJETIVO: Determinar la prevalencia de anticuerpos contra Trypanosoma cruzi en donadores del Hospital General Regional del Instituto Mexicano del Seguro Social (IMSS) en la ciudad de Orizaba, Veracruz. MATERIAL Y MÉTODOS: Se examinaron muestras de donadores del banco de sangre del Hospital General Regional (HGRO) del IMSS para la búsqueda de antiT. cruzi por ELISA, Western blot e IFI, utilizando una proteína recombinante (MBP::Hsp70) y un extracto crudo de epimastigotes. Las muestras fueron obtenidas entre los meses de octubre de 2001 a enero de 2002. RESULTADOS: Los 420 donadores de sangre analizados fueron seronegativos para HBV, HCV, BrA, VDRL y HIV. Despu‚s del tamizaje de los 420 donadores, se identificaron dos individuos seropositivos por las pruebas de ELISA, Western blot e IFI, con una seroprevalencia de 0.48 por ciento. CONCLUSIONES: En este estudio se muestran evidencias de seropositividad para T. cruzi en donadores de sangre del HGRO, lo que sugiere la existencia de riesgo de contaminaci¢n por transfusión sanguínea. Por tal motivo, es necesario aplicar programas para el tamizaje serológico a través de técnicas inmunológicas con alta sensibilidad y especificidad.

Detección de Trypanosoma cruzi en muestras experimentales por el método de reacción en cadena de la ADN polimerasa / Detection of trypanosoma cruzi in experimental samples by means of DNA polymerase chain reaction method

La enfermedad de Chagas (tripanosomiasis Americana) afecta a más de 20 millones de personas en América. El 30 por ciento de los infectados desarrollan enfermedad crónica, miocardiopatía dilatada, sin tratamiento efectivo. En México el 40 por ciento de los sujetos con miocardioatía dilatada tienen anticuerpos contra Trypanosoma cruzi. En la fase crónica la parasitemia es esporádica y escasa; no es posible detectar el parásito por métodos directos. Comunicamos un método capaz de detectar T. cruzi, sebsible y específico. Dos oligonucleótidos (KNs1 y KNS2), diseñados a partir de la secuencia de ADN de minicírculos de cinetoplasto, se usaron para amplificar la región hipervariable por el método de la reacción en cadena de la ADN polimerasa (PCR). Se logró detectar el equivalente de 0.8 a 1.5 moléculas de minicírculo o 1/12,000 de parásito. AI aplicar el método a muestras de ADN de tejidos de ratones infectados con parásito, se amplificó un producto reconocido por una sonda específica para minicírculos. Estos resultados se correlacionan con estudios inmunohistoquímicos que muestran la presencia tisular del parásito a varios tiempos estudiados. El método desarrollado puede tener aplicación en estudios clínicos, epidemiológicos de campo y de vigilancia en bancos de sangre.